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微生物學筆記

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     4、TCA循環(huán)(三羧酸循環(huán))
     真核在線粒體中,原核在細胞質(zhì)中。
     TCA在代謝中占有重要樞紐地位 
     四種途徑產(chǎn)能比較: 
     二、遞氫和受氫
     根據(jù)遞氫特別是最終氫受體不同劃分
     1、發(fā)酵(分子內(nèi)呼吸)
     無氧條件下,底物脫氫后產(chǎn)生的還原力不經(jīng)呼吸鏈而直接傳遞給某一中間代謝物的低效產(chǎn)能反應。
     在此過程中,有機物是氧化基質(zhì),又是最終氫受體,且是未徹底氧化產(chǎn)物,結(jié)果仍積累有機物,產(chǎn)能少。
     在發(fā)酵過程中,借底物水平磷酸化合成ATP,是合成ATP唯一方式。
     X?P + ADP ? ATP + X
     高能化合物:1 ,3- 二磷酸甘油酸、乙酰磷酸、氨甲酰磷酸、PEP、 酰基輔酶A。
     2、有氧呼吸(呼吸作用)
     底物脫氫后,經(jīng)完整的呼吸鏈(電子傳遞鏈)遞氫,以分子氧作為最終氫受體,產(chǎn)生水和放出能量。
     在電子傳遞過程中,通過與氧化磷酸化反應偶聯(lián),產(chǎn)生ATP,稱氧化磷酸化。
     1)呼吸鏈組成與順序:
     2)真核與原核生物呼吸鏈比較:
     位置、組成
     3、無氧呼吸(厭氧呼吸)
     以無機氧化物代替分子氧作為最終氫受體的生物氧化。
     氧化磷酸化合成ATP,但有些能量轉(zhuǎn)移到最終受體,產(chǎn)能不多。
     依據(jù)最終氫受體不同,分成多種類型。
     1)硝酸鹽還原作用(反硝化作用)
     由硝酸鹽逐步還原成分子氮的過程。使土壤N損失,肥力下降。屬異化性硝酸鹽還原。
     2)硫酸鹽還原作用(異化性)
     通常以乳酸為基質(zhì),積累乙酸,以SO42-為最終氫受體。脫硫弧菌 Desulfovibrio sp.
     3)甲烷發(fā)酵作用
     產(chǎn)甲烷菌以二氧化碳為最終氫受體。如甲烷桿菌 Methanobacterium
     四、不同呼吸類型微生物
     與分子氧的不同關系
     1、好氧微生物 aerobic
     有氧條件下生長,進行有氧呼吸。
     2、厭氧微生物 anaerobic
     不需分子氧,進行無氧呼吸或發(fā)酵。
     專性厭氧菌-只能在無氧條件下生長,分子氧對其有害。主要梭菌、產(chǎn)甲烷細菌、脫硫3、兼性厭氧微生物 facultative anaerobic
     有氧與無氧條件下均能生長,但以不同氧化方式獲得能量。
     如酵母菌、一些腸道菌、反硝化細菌。
     酵母菌酒精發(fā)酵時通入氧氣,發(fā)酵減慢,停止產(chǎn)生乙醇,葡萄糖消耗速率下降,氧對發(fā)酵的這種抑制現(xiàn)象稱為巴斯德效應。
     4、微好氧微生物 microaerophilic
     在氧濃度較低條件下生長,進行有氧呼吸。
     氧的危害
     O2 + e → O2- 超氧化物自由基
     有一些酶可解除危害。
     五、不同發(fā)酵類型 
     對G發(fā)酵產(chǎn)物不同劃分,糖的無氧降解。
     (一)乙醇發(fā)酵:
     EMP 脫羧酶 脫氫酶
     1.酵母無氧條件 :G → 丙酮酸 → 乙醛 → 乙醇
     此屬正常形式,稱Ⅰ型發(fā)酵,亦稱同型酒精發(fā)酵
     2.若有亞硫酸酸氫鈉存在,與乙醛結(jié)合,而使磷酸二羥丙酮作為受氫體。
     磷酸二羥丙酮 → α-磷酸甘油 → 甘油
     此稱為Ⅱ型發(fā)酵,但仍有乙醇產(chǎn)生。
     3.堿性條件下(PH7.6),乙醛分子間歧化反應
     一分子乙醛 → 乙酸(氧化)
     一分子乙醛 → 乙醇(還原) 
     還有磷酸二羥丙酮 → 甘油
     4.細菌同型酒精發(fā)酵,ED途徑進行,產(chǎn)生2分子乙醇。
     5.細菌異型酒精發(fā)酵,通過HMP途徑進行,產(chǎn)生1分子乙醇和1分子乳酸。
     總反應式如下:
     G+2ADP+2Pi → 2乙醇+2 CO2+2ATP
     G+HSO3- → 甘油+乙醛oHSO3-+CO2
     2G → 2甘油+乙酸+乙醇+CO2
     G+ADP+Pi → 2乙醇+2 CO2+ATP
     G+ADP+Pi → 乳酸+乙醇+CO2+ATP
     (二)乳酸發(fā)酵
     發(fā)酵產(chǎn)物中只有乳酸,經(jīng) EMP途徑,稱為同型乳酸發(fā)酵(德氏乳桿菌)。
     發(fā)酵產(chǎn)物中除乳酸外,還有其他,如乙醇、CO2等稱異型乳酸發(fā)酵。經(jīng)HMP 途徑。如腸膜狀明串珠菌Leuconostoc 
     mesenteroides
     總反應式:
     同型:G+2ADP+2Pi → 2乳酸+2ATP 
     異型:G+ADP+Pi → 1乳酸+乙醇+CO2+ATP
     真菌:丙酮酸→ 2分子乙醇→琥珀酸→延胡索酸 →蘋果酸 → 乳酸 



  
    三)丁酸型發(fā)酵
     Clostridium 
     所進行,特點是產(chǎn)物中都有丁酸。不同種類因酶系統(tǒng)不同,最終產(chǎn)物除丁酸外,還有其他產(chǎn)物。重要的有丁酸發(fā)酵、丙酮丁醇發(fā)酵、丁醇異丙醇發(fā)酵。
     (四)丙酸發(fā)酵
     由丙酸細菌Propionibacterium,與乳酸細菌相似,發(fā)酵產(chǎn)物有丙酸、乙酸、CO2。
     丙酸 → 丙酸鈣(防腐劑)
     (五)混合酸發(fā)酵
     腸桿菌特征,產(chǎn)物有甲酸、乙酸、乳酸、琥珀酸等有機酸,還有CO2、H2、少量2,3-丁二醇、乙酰甲基甲醇、甘油等。其中兩個重要的鑒定反應:
     1.V.P.實驗(Vagex-Proskauer)
     產(chǎn)氣氣桿菌產(chǎn)2,3-丁二醇比較多,堿性條件下可氧化為二乙酰,再與肌酸或胍類衍生物縮合成紅色物質(zhì),若加入α-萘酚、肌酸可促進反應,此稱VP反應。
     大腸桿菌不產(chǎn)生或少產(chǎn)生2,3-丁二醇,VP反應陰性。
     2.甲基紅(M.R)反應
     大腸桿菌產(chǎn)酸多,使pH降至4.2, 
     甲基紅由黃變紅,反應陽性。產(chǎn)氣氣桿菌產(chǎn)2,3-丁二醇,產(chǎn)酸少(pH5.3),甲基紅反應陰性。
     3.另外,甲酸只在堿性環(huán)境下積累(pH7.3),而pH6.2以下,不產(chǎn)甲酸, HCOOH → 
     CO2+H2。甲酸脫氫酶與氫化酶聯(lián)合作用。
     傷寒桿菌無甲酸脫氫酶,只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。
     2節(jié):分解代謝
     一、淀粉的分解
     淀粉有兩類:一類是直鏈淀粉(α-1,4-糖苷鍵);另一類是支鏈淀粉(支鏈α-1,4、分支點α-1,6-糖苷鍵)。
     1、液化型淀粉酶(α-淀粉酶):分子內(nèi)α-1,4-糖苷鍵,不作用α-1,6-糖苷鍵以及靠近α-1,6-糖苷鍵的α-1,4-糖苷鍵。作用的結(jié)果是產(chǎn)生麥芽糖,含有6個葡萄糖單位的寡糖和帶有支鏈的寡糖,使黏度下降。枯草桿菌通常用作α-淀粉酶的生產(chǎn)菌。
     2、糖化型淀粉酶:這是一類酶的總稱。共同特點是可以將淀粉水解成麥芽糖或葡萄糖,包括以下三種:
     (1)淀粉-1,4-麥芽糖苷酶(β-淀粉酶):從非還原性末端開始,按雙糖為單位,逐步作用于α-1,4生成麥芽糖。但不作用于α-1,6,遇到α-1,6時,作用停止。作用于淀粉后的產(chǎn)物是麥芽糖與極限糊精。 
     (2)淀粉-1,4-葡萄糖糖苷酶(糖化酶): 
     從非還原性末端開始,依次以葡萄糖為單位逐步作用于α-1,4,生成葡萄糖,但能越過α-1,6。根霉與曲霉普遍都能合成與分泌此酶。
     (3)淀粉-1,6-葡萄糖苷酶(異淀粉酶):此酶專門作用α-1,6-糖苷鍵。
     二、纖維素與半纖維素的分解
     纖維素是葡萄糖通過β-1,4-糖苷鍵連接,分子量更大,不溶于水,不能直接被人和動物消化,但它可以被許多真菌包括木霉、青霉、根霉以及放線菌與細菌中的一些菌株分解與利用 
     纖維素酶復合物:纖維二糖酶(β-葡萄糖苷酶),C1酶, Cx酶。
     天然纖維素 C1酶 水合非結(jié)晶纖維素 Cx酶 纖維二糖+葡萄糖
     纖維二糖酶 
     葡萄糖
     細菌的纖維素酶位于細胞膜上,真菌和放線菌的纖維素酶是胞外酶。
     自然界中纖維素豐富,對纖維素的研究早就成為重要的課題了。
     在植物細胞壁還有半纖維素,包括各種聚戊糖與聚已糖,最常見的半纖維素是木聚糖。半纖維素容易被微生物分解,但由于半纖維素的組成類型很多,因而分解它們的酶也各不同。生產(chǎn)半纖維素酶的微生物主要有曲霉、根霉、木霉等。
     三、果膠質(zhì)的分解
     果膠質(zhì)是構(gòu)成高等植物細胞間質(zhì)的主要物質(zhì),主要由D-半乳糖醛酸通過α-1,4-糖苷鍵連接。
     天然果膠質(zhì)(原果膠)原果膠酶 水溶性果膠 果膠甲酯水解酶 果膠酸 果膠酸酶 半乳糖醛酸。

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